Gen A/B của độc tố Clostridium difficile（C.diff）
Tên sản phẩm
Bộ dụng cụ phát hiện axit nucleic HWTS-OT031A cho gen độc tố A/B của Clostridium difficile (C.diff) (PCR huỳnh quang)
Giấy chứng nhận
CE
Dịch tễ học
Clostridium difficile (CD), một loại vi khuẩn Gram dương kỵ khí, sinh bào tử, là một trong những tác nhân gây bệnh chính gây nhiễm trùng đường ruột bệnh viện. Trên lâm sàng, khoảng 15%~25% tiêu chảy liên quan đến kháng sinh, 50%~75% viêm đại tràng liên quan đến kháng sinh và 95%~100% viêm ruột giả mạc là do nhiễm Clostridium difficile (CDI). Clostridium difficile là một tác nhân gây bệnh có điều kiện, bao gồm các chủng sinh độc tố và các chủng không sinh độc tố.
Kênh
| FAM | tcdAgen |
| ROX | tcdBgen |
| VIC/HEX | Kiểm soát nội bộ |
Thông số kỹ thuật
| Kho | ≤-18℃ |
| Hạn sử dụng | 12 tháng |
| Loại mẫu vật | ghế đẩu |
| Tt | ≤38 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 200CFU/mL |
| Tính đặc hiệu | sử dụng bộ dụng cụ này để phát hiện các tác nhân gây bệnh đường ruột khác như Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella, Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, Streptococcus nhóm B, các chủng không gây bệnh Clostridium difficile, Adenovirus, rotavirus, norovirus, virus cúm A, virus cúm B và DNA bộ gen người, tất cả kết quả đều âm tính. |
| Các công cụ áp dụng | Hệ thống PCR thời gian thực Applied Biosystems 7500 Hệ thống PCR thời gian thực nhanh Applied Biosystems 7500 QuantStudio®5 Hệ thống PCR thời gian thực Hệ thống PCR thời gian thực SLAN-96P (Công ty TNHH Công nghệ Y tế Hongshi) LightCycler®Hệ thống PCR thời gian thực 480 Hệ thống phát hiện PCR thời gian thực LineGene 9600 PlusFQD-96A，Hàng ChâuCông nghệ sinh học) Máy luân nhiệt định lượng thời gian thực MA-6000 (Công ty TNHH Tô Châu Molarray) Hệ thống PCR thời gian thực BioRad CFX96 Hệ thống PCR thời gian thực BioRad CFX Opus 96 |
Luồng công việc
Lựa chọn 1.
Thêm 180μL dung dịch đệm lysozyme vào kết tủa (pha loãng lysozyme thành 20mg/mL bằng chất pha loãng lysozyme), dùng pipet trộn đều và xử lý ở 37°C trong hơn 30 phút. Lấy 1,5mL ống ly tâm không chứa RNase/DNase và thêm180μL đối chứng dương tính và đối chứng âm tính theo trình tự. Thêm10Nhỏ μL dung dịch đối chứng nội vào mẫu cần xét nghiệm, dung dịch đối chứng dương và dung dịch đối chứng âm theo trình tự, sau đó sử dụng Thuốc thử Chiết xuất hoặc Tinh chế Axit Nucleic (YDP302) của Công ty TNHH Tiangen Biotech (Bắc Kinh) để chiết xuất DNA mẫu tiếp theo, đồng thời tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn sử dụng cho từng bước cụ thể. Sử dụng H2S không chứa DNase/RNase.2O để rửa giải và thể tích rửa giải khuyến nghị là 100μL.
Lựa chọn 2.
Lấy 1,5 mL ống ly tâm không chứa RNase/DNase và thêm 200 μL mẫu đối chứng dương tính và mẫu đối chứng âm tính theo trình tự. Thêm10Nhỏ μL dung dịch đối chứng nội, đối chứng dương và đối chứng âm theo thứ tự vào mẫu cần xét nghiệm, sau đó sử dụng Bộ kit DNA/RNA virus Macro & Micro-Test (HWTS-3004-32, HWTS-3004-48, HWTS-3004-96) và Máy chiết xuất axit nucleic tự động Macro & Micro-Test (HWTS-3006). Việc chiết xuất cần được thực hiện nghiêm ngặt theo hướng dẫn sử dụng, và thể tích rửa giải khuyến nghị là 80μL.
