Gen kháng carbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Tên sản phẩm
Bộ phát hiện gen kháng carbapenem HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR huỳnh quang)
Dịch tễ học
Kháng sinh carbapenem là kháng sinh nhóm β-lactam không điển hình có phổ kháng khuẩn rộng nhất và hoạt tính kháng khuẩn mạnh nhất.Do tính ổn định với β-lactamase và độc tính thấp nên nó đã trở thành một trong những loại thuốc kháng khuẩn quan trọng nhất để điều trị các bệnh nhiễm trùng nặng do vi khuẩn.Carbapenem có độ ổn định cao đối với β-lactamase phổ mở rộng (ESBL) qua trung gian plasmid, nhiễm sắc thể và cephalosporinase qua trung gian plasmid (enzym AmpC).
Kênh
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Kiểm soát nội bộ | Kiểm soát nội bộ |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Các thông số kỹ thuật
| Kho | ≤-18oC |
| Hạn sử dụng | 12 tháng |
| Loại mẫu | Đờm, khuẩn lạc sạch, phết trực tràng |
| Ct | 36 |
| CV | 5,0% |
| LoD | 103CFU/mL |
| Tính đặc hiệu | a) Bộ sản phẩm phát hiện các tài liệu tham khảo tiêu cực của công ty đã được tiêu chuẩn hóa và kết quả đáp ứng các yêu cầu của các tài liệu tham khảo tương ứng. b) Kết quả thử phản ứng chéo cho thấy bộ sản phẩm này không có phản ứng chéo với các tác nhân gây bệnh đường hô hấp khác như Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilusenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Respiratory adenovirus, Enterococcus hoặc các mẫu chứa gen kháng thuốc khác CTX, mecA, SME, SHV, TEM, v.v. c) Chống nhiễu: Mucin, Minocycline, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Ciprofloxacin Hydrochloride, Levofloxacin, Clavulanic acid, Roxithromycin được chọn để thử nghiệm nhiễu và kết quả cho thấy các chất gây nhiễu nêu trên không có phản ứng gây nhiễu để phát hiện các gen kháng carbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM và IMP. |
| Dụng cụ áp dụng | Hệ thống sinh học ứng dụng 7500 Hệ thống PCR thời gian thực Hệ thống PCR thời gian thực QuantStudio®5 Hệ thống PCR thời gian thực SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Hệ thống PCR thời gian thực LightCycler®480 Hệ thống phát hiện PCR thời gian thực LineGene 9600 Plus (FQD-96A,Hàng Châucông nghệ sinh học) Máy luân nhiệt định lượng thời gian thực MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Hệ thống PCR thời gian thực BioRad CFX96 Hệ thống PCR thời gian thực BioRad CFX Opus 96 |
Luồng công việc
Lựa chọn 1.
Thuốc thử chiết được khuyến nghị: Bộ DNA/RNA tổng quát & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (có thể được sử dụng với Máy chiết axit nucleic tự động Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) của Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Thêm 200μL nước muối thông thường vào thallus kết tủa.Các bước tiếp theo phải tuân theo hướng dẫn chiết và thể tích rửa giải được khuyến nghị là100μL.
Lựa chọn 2.
Thuốc thử chiết được khuyến nghị: Thuốc thử chiết hoặc tinh chế axit nucleic (YDP302) của Tiangen Biotech (Bắc Kinh). Quá trình chiết nên được bắt đầu theo đúng bước 2 của hướng dẫn sử dụng (thêm 200μL dung dịch đệm GA vào kết tủa thallus , và lắc cho đến khi thallus hoàn toàn lơ lửng).Sử dụng nước không chứa RNase/DNase để rửa giải và thể tích rửa giải được khuyến nghị là 100μL.
Tùy chọn 3.
Thuốc thử chiết được khuyến nghị: Thuốc thử giải phóng mẫu thử nghiệm vĩ mô & vi mô.Mẫu đờm cần được rửa sạch bằng cách thêm 1mL nước muối sinh lý bình thường vào kết tủa thallus đã xử lý nêu trên, ly tâm với tốc độ 13000 vòng/phút trong 5 phút, loại bỏ phần nổi phía trên (giữ lại 10-20µL phần nổi phía trên).Đối với tăm bông trực tràng và khuẩn lạc nguyên chất, thêm trực tiếp 50μL thuốc thử giải phóng mẫu vào kết tủa thallus đã xử lý nêu trên và các bước tiếp theo phải được chiết theo hướng dẫn sử dụng.
